CHPOMPISTE 0 Posté(e) le 4 août 2008 Quelques généralités La drosophile ( drosophila melanogaster ) est un insecte diptère plus communément connu sous le nom de mouche du vinaigre et que l'on rencontre sur les fruits très mûrs . Cette petite mouche , de 3 à 4 mm de longueur s'élève très facilement au laboratoire . C'est un matériel de choix pour les expériences de génétique ; en effet , son élevage étant simple et son cycle de vie très court on obtient de nombreuses générations en un temps relativement court .De plus , on reconnait aisément du moins sur la souche dite "sauvage" les mâles des femelles . Chez la drosophile , la plupart des mutations portent sur des caractères très distincts du type "sauvage" , donc leur transmission est facile à suivre au fil des générations . Les principales mutations portent sur la couleur du corps , des yeux , et la taille des ailes .Contrairement à la souche sauvage , les souches mutantes , pour la plupart , vivent difficilement dans la nature et devront être conservées en élevage au laboratoire . Cycle de la drosophile (schématisation) Elevage de drosophiles au laboratoire La drosophile s'élève facilement en laboratoire sur un milieu artificiel. Composition et quantités pour un litre de milieu de culture semoule de maïs 80 à 100 g levure de bière(ou extrait autolythique) 80 g pour la levure fraîche 20 g pour l'extrait agar-agar 16 g nipagine ( solution à 10 % d'hydroxy-benzoate de méthyle dans de l'éthanol à 95 % ) 40 ml eau distillée compléter à 1000 ml Préparation du milieu de culture Dans un bécher ou même dans une casserole , délayer la semoule de maïs avec un peu d'eau froide , ajouter en agitant la levure ( ou extrait de levure ) , l'agar-agar , et la nipagine, compléter à 1 litre avec de l'eau distillée et porter à ébullition pendant 1 à 2 minutes ( attention , agiter sans arrêt pour ne pas brûler le fond du récipient ). Le milieu étant prêt , le répartir dans des flacons en verre de 250 ou de 500 ml , les porter à 120°C pendant 20 minutes ( autoclave ou autocuiseur ).Répartir ensuite ce milieu ( encore chaud , le milieu se solidifie très rapidement ) dans les récipients prévus pour l'élevage ( la hauteur de milieu devra être d'environ 2 à 3 cm , plus si les récipients sont étroits ).Ces récipients peuvent être des erlenmeyers de 200 ml , des tubes à essais de large diamètre ( ceux qui servent à la culture in vitro ) ou tout autre récipient en votre possession .Fermer ces tubes avec du coton cardé et attendre le refroidissement total avant d'introduire les drosophiles. Si les récipients utilisés sont de grande contenance ( 200 ml ou plus ) prévoir des bandelettes de papier filtre que l'on disposera à l'intérieur , les larves viendront se fixer dessus pour le passage à la pupe . Mise en élevage d'une souche sauvage de drosophiles A partir d'une souche achetée chez des fournisseurs spécialisés ou ( pour l'académie de Toulouse au réseau académie-université ) sélectionner des individus mâles et femelles . Pour cela , il faut les anesthésier , afin de pouvoir les observer à la loupe binoculaire. Pour l'anesthésie , on utilise un fil électrique très fin ( fil de téléphone par exemple ) au bout duquel on place une petite boule de coton , tremper le coton dans de l'éther diéthylique , l'égoutter puis l'introduire dans le récipient contenant les drosophiles , attendre 1 à 2 minutes , quand les individus ne bougent plus dans le récipient , vider son contenu dans une boite de Pétri et les observer sans tarder sous une loupe binoculaire , à l'aide d'un petit pinceau , trier les mâles des femelles( pour démarrer un élevage juste quelques individus suffisent , on peut mettre par exemple 5 à 6 mâles et une dizaine de femelles ). Toujours à l'aide du pinceau , introduire les mouches dans le récipient contenant le milieu de culture , incliner celui-ci afin d'éviter que les insectes ne se "collent" sur le milieu de culture , attendre leur réveil pour remettre le récipient en position verticale.Au bout de quelques jours , les femelles pondent leurs oeufs dans le milieu de culture et 2 à 3 jours après la ponte naissent de jeunes larves ( asticots ) qui vont se nourrir du milieu et croître rapidement; en effet au bout de quatre jours les larves devenues plus grosses s'immobilisent pour donner une pupe et quatre jours après l'apparition des pupes naissent de jeunes mouches semblables à leurs parents. Réalisation d'un croisement entre deux souches Procéder comme pour un élevage classique mais cette fois il y a quelques contraintes . Choisir les mâles d'une souche et les femelles d'une autre souche en les triant sous la loupe binoculaire ( pour les mâles il n'y a pas de problèmes , mais pour les femelles elles doivent être vierges si l'on veut réaliser un bon croisement et donc , il faut les trier entre 6 à 8 heures après leur éclosion ). Les anesthésier comme précédemment et introduire dans le récipient prévu pour l'élevage 5 à 6 mâles d'une souche X et une dizaine de femelles d'une souche Y ( bien sûr il ne faut pas introduire de mâles Y ou de femelles X , donc il faut faire très attention en les triant) . Faire également un croisement entre des mâles Y et des femelles X dans un autre récipient , indiquer sur chacun d'eux la date du croisement et le type de croisement réalisé , au bout de quelques jours quand on aperçoit des larves , ouvrir le récipient et lacher les parents dans la nature pour ne pas avoir d'erreurs au comptage futur ( si aucune larve n'est visible , recommencer un croisement ). Les drosophiles ainsi obtenues seront un souche hybride ou F1 . Pour obtenir une F2 , il faut proceder de la même manière en croisant un mâle F1 et une femelle F1 . On peut également pratiquer un croisement test ( c'est un croisement entre un individu de la F1 et le parent récessif ). Quelques souches de drosophiles ( les plus communes ) vestigiale ébony-sépia sépia-vestigiale white gsvadmin@ac-toulouse Partager ce message Lien à poster Partager sur d’autres sites
demon76 0 Posté(e) le 4 août 2008 c'est sur ces mouches que l on apprends la génétique en terminale et première S un autre avantage c'est que beaucoup de gène sont indépendant Partager ce message Lien à poster Partager sur d’autres sites
ninie de ch'nord 0 Posté(e) le 4 août 2008 merci pour l'info chpompiste Partager ce message Lien à poster Partager sur d’autres sites
pogoman-dragonpogona 0 Posté(e) le 4 août 2008 :20: Partager ce message Lien à poster Partager sur d’autres sites
